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細(xì)胞培養(yǎng)簡介-移動細(xì)胞觀察用倒置生物顯微鏡
細(xì)胞培養(yǎng)
所謂的體外細(xì)胞與組織培養(yǎng)，是指在活體外利用人工供給的養(yǎng)分與
環(huán)境來維持細(xì)胞的生命。體外細(xì)胞培養(yǎng)需瞭解細(xì)胞生長週期，培養(yǎng)液特
性，細(xì)胞解凍、分盤、及植入支架(Scaffold)，及細(xì)胞計數(shù)，
以下就各項實驗之目的加以說明：
以下就各項實驗之目的加以說明：
●細(xì)胞解凍：冷凍細(xì)胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結(jié)晶而
對細(xì)胞造成傷害，導(dǎo)致細(xì)胞之死亡。解凍的方法：
1. 自液態(tài)氮中取出冷凍管，立即放入 37°C 水槽中快速解凍。
2. 取出 0.9ml 解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入有培養(yǎng)基之 37°C培養(yǎng)容器內(nèi)
(稀釋比例為 1:10～1:15)，混合均勻，放入 CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞貼附隨即更換新鮮培養(yǎng)基，
另取 0.1ml 解凍細(xì)胞懸浮液作存活測試。
(稀釋比例為 1:10～1:15)，混合均勻，放入 CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞貼附隨即更換新鮮培養(yǎng)基，
另取 0.1ml 解凍細(xì)胞懸浮液作存活測試。
3. 若需去除冷凍保護劑，則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有 5-10ml
培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，以 1,500 rpm, 離心 5 分鐘，移去上清液，加
入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入 CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞活化后，約需數(shù)日或繼代一至二代，細(xì)胞生長或特性表現(xiàn)才會
恢復(fù)正常﹙例如產(chǎn)生單株抗體或是其他蛋白質(zhì)﹚，故解凍后的細(xì)胞需經(jīng)
過培養(yǎng)后分盤始能做為實驗用
客服1