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顯微鏡下調整針的焦距-微小操作制程輔助儀器
顯微注射
（一）準備顯微注射用針
1.取一干凈之大培養皿，在一側鋪一塊封口膜（parafilm），將 parafilm
折疊成有厚度條狀，并黏上雙面膠，固定在另外一側。
2.衛生紙浸水揉成團狀，置培養皿兩側。
3. 在上面滴上要注射之 DNA，小心放上針，使針的恰巧碰到 DNA
水珠，針的另一端固定在雙面膠上墊高。如下頁圖四所示。放置一段
時間，利用虹吸作用可以將液體吸入針中4.將針固定在 needle holder 上，用粗調節輪將握針器末端的針移至中
央。
5.顯微鏡下調整針的焦距并將針頭位置移到視野的正中央，接著將針輕
微地上移，使針的前端變得稍微模糊
制作顯微注射用玻片（microinjection pad）及測試
1.配制 2﹪的 agarose。
2.取一玻片，在上面滴上一滴 agarose（約 25μl），在其未凝固之前蓋
上另一玻片，使之呈扁平狀，等到凝固后輕輕將上方玻片水平移開。
3.反覆 2.制作數個 microinjection pad。
4.放在室溫下過夜或是放在 80°C 的 heater 上 1 小時，放在一旁備用。
5.取一完成的 microinjection pad，在上面呵氣，紀錄呵氣時間。迅速滴
上一滴 Halocarbon oil 700。
6. 用挑蟲用針將一只線蟲挑起并輕放到 microinjection pad 上，用睫毛較
長的針輕壓蟲，使蟲可以固定在 microinjection pad 上。
7. 約半小時后，在油滴中加入 PBS，觀察線蟲是否有離開
microinjection pad 并游動
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