大家好，這里是老上光顯微鏡知識(shí)課堂，在這里你可以學(xué)到所有關(guān)于顯微鏡知識(shí)，好的，請(qǐng)看下面文章： 熒光顯微鏡的一個(gè)重要特點(diǎn)是它能夠檢測(cè)熒光物體，有時(shí)是不可見(jiàn)的，甚至非常明亮和黑暗的背景（通常是黑色的）。圖像亮度-優(yōu)化圖像亮度的重要方面之一是確保提供樣品，以適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)激發(fā)與樣品相連的每個(gè)發(fā)色團(tuán)足夠的光能。選擇合適的擋板濾光片以使發(fā)射到觀察管或相機(jī)管的熒光量更大化很重要。我們已經(jīng)創(chuàng)建了一張熒光激發(fā)和發(fā)射數(shù)據(jù)表，這將有助于實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。高能源，如汞和氙燃燒器，在極窄的近紫外和可見(jiàn)光范圍內(nèi)提供大量的激發(fā)能量。當(dāng)這些光源耦合在一起同時(shí)阻擋那些可以傳輸所選波長(zhǎng)的不需要的激發(fā)濾波器時(shí)，適當(dāng)?shù)剡x擇它們，然后滿(mǎn)足Zui st隔板濾光片，防止不必要的波長(zhǎng)進(jìn)入觀測(cè)管，是一個(gè)主要問(wèn)題。激發(fā)的總能量遠(yuǎn)大于發(fā)射的能量，因此選擇一個(gè)有效的隔板濾光片來(lái)防止不必要的波長(zhǎng)熒光是很重要的。在允許從樣品通過(guò)的同時(shí)發(fā)出氣味。熒光的任意目標(biāo)必須能夠有效地在近紫外區(qū)域和整個(gè)可見(jiàn)光譜中透射光。在熒光顯微鏡中工作的物體在低發(fā)射光能級(jí)圖中非常重要因?yàn)樗鼈兪菑臉悠分惺占獾墓δ堋Ｎ镧R接收的光的錐角由作為物鏡的數(shù)值孔徑(NA)決定，如圖1所示。透射光中的熒光顯微鏡達(dá)到數(shù)值孔徑wh的平方。ose強(qiáng)度與物鏡和聚光器的總放大率的平方成正比。這個(gè)差值是物鏡作為聚光器的主要功能，聚光器用于聚焦在樣品上，然后作為通常用于成像的光采集的結(jié)果。其意義是顯而易見(jiàn)的：高數(shù)值孔徑物鏡產(chǎn)生比相同放大率低得多的數(shù)值孔徑高得多的圖像。例如，其他一切都是相等的。40倍透鏡的NA為1.0，將帶來(lái)數(shù)值孔徑為0.65的圖像，其亮度是40倍透鏡的五倍以上。此外，如果可能，低功率目鏡（如8倍放大率）也將比更普通的圖像增加圖像的亮度。此外，反射光中的熒光僅在觀察區(qū)域內(nèi)激發(fā)凝聚物透鏡（其作為凝聚器的功能），結(jié)果激發(fā)光的強(qiáng)度遠(yuǎn)高于透射光中的暗場(chǎng)熒光的強(qiáng)度。d光，其中激發(fā)區(qū)域作為物鏡是不變的。此外，在暗視場(chǎng)中，物鏡的數(shù)值孔徑必須減小到低于保留視場(chǎng)的暗冷凝器。由于聚焦于同一平面上的各種顏色會(huì)產(chǎn)生更清晰的圖像，因此希望用高質(zhì)量的色差校正Zui物鏡。此外，更好的球面校正和更清晰的圖像。因此，物鏡的選擇是平場(chǎng)消色差物鏡。平面場(chǎng)熒光物鏡。這些透鏡元件及其粘結(jié)劑應(yīng)設(shè)計(jì)成當(dāng)在400nm以下的波長(zhǎng)(近紫外光中的光)照射時(shí)不會(huì)自動(dòng)熒光。在可能的情況下，應(yīng)使用油浸物鏡來(lái)降低光損耗。現(xiàn)代顯微鏡制造商努力為客戶(hù)提供完全沒(méi)有自發(fā)熒光污染物的光學(xué)元件，但在這方面也應(yīng)當(dāng)考慮自發(fā)熒光將降低s的對(duì)比度。通過(guò)增加背景亮度。
    
     鏡子：類(lèi)似于面對(duì)水銀燈的碗形鏡子，因?yàn)樗y燈發(fā)出的光是漫射的，所以增加了這個(gè)集光裝置以確保熒光顯微鏡更好的照明效率來(lái)收集水銀燈沿相反方向發(fā)出的光。照明。
    
     集光透鏡：水銀燈和反射器聚光形成的平行光束，提供熒光照明系統(tǒng)。
    
     3)調(diào)整收集器聚焦旋鈕以清晰地調(diào)整圖像和鏡子(如下所示)，并且會(huì)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)圖像，但是它們的位置是向上和向下或左和右；
    
     5)此時(shí)中心已經(jīng)調(diào)整，可以取樣觀察，如果視野亮度不均勻，可以調(diào)整調(diào)焦旋鈕。
    
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