顯微鏡 生物北京大學(xué)教授研制了超靈敏結(jié)構(gòu)光超
作者: 發(fā)布時(shí)間:2022-07-02 17:42:27點(diǎn)擊:3611
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用戶1914998866 2018~0628 20:02
陳亮一的團(tuán)隊(duì)來(lái)自北京大學(xué),譚珊的團(tuán)隊(duì)從華中科技大學(xué)發(fā)明了一種高度敏感的結(jié)構(gòu)光的超高分辨率顯微鏡,Hessian的SIM卡。這個(gè)結(jié)果在線發(fā)表在全文的形式在自然生物技術(shù)(影響因子41.67)最近。本文的標(biāo)題是很快的,長(zhǎng)期的,以麻布結(jié)構(gòu)照明顯微鏡高分辨成像。圖1:海神結(jié)構(gòu)光顯微鏡分析了囊泡融合孔形成的全過(guò)程。以上:實(shí)際動(dòng)態(tài)過(guò)程分析如下:四從;從實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到的囊泡融合狀態(tài)。
當(dāng)每秒獲得188個(gè)超高分辨率圖像時(shí),HeISEN結(jié)構(gòu)光顯微鏡的空間分辨率可達(dá)85納米,并且可以區(qū)分單個(gè)頭發(fā)的1 / 600至1 / 800尺寸結(jié)構(gòu)。共聚焦顯微鏡照明所需的光照不到三個(gè)數(shù)量級(jí),由于極低的光漂白和光毒性,在100 Hz超高分辨率成像下,通過(guò)連續(xù)采樣10分鐘可以獲得180000個(gè)超高分辨率圖像。或在1 Hz超高分辨率成像下連續(xù)1小時(shí)超高分辨率成像而不進(jìn)行光漂白。
與獲得2014年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)的受激輻射損失超高分辨率顯微鏡(STED)相比,海森結(jié)構(gòu)光顯微鏡(HESM)在活細(xì)胞超高分辨率成像方面具有明顯的優(yōu)勢(shì),具有極高的時(shí)間分辨率和低的光毒性。例如,在觀察囊泡和細(xì)胞質(zhì)膜融合所釋放的神經(jīng)遞質(zhì)和激素的過(guò)程中,Heisen結(jié)構(gòu)光顯微鏡和STED顯微鏡(分辨率60nm,大約每秒5幅;發(fā)表在2018年3月《武鋼細(xì)胞》上的文章實(shí)驗(yàn)室)可以觀察到融合形成的小泡,但是海森結(jié)構(gòu)光顯微鏡分析四種不同的小泡融合中間狀態(tài),包括小泡開放、小泡塌陷、小泡維持和最終小泡-細(xì)胞質(zhì)膜融合。囊泡形成的整個(gè)過(guò)程是可視化的(圖1)。
2。在Heisen結(jié)構(gòu)光顯微鏡下觀察COS-7細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與線粒體的動(dòng)態(tài)相互作用。藍(lán)色線粒體用MitoTracker Green標(biāo)記,嵴結(jié)構(gòu)清晰。紫紅色被標(biāo)記為SEC61 Mc櫻桃。
這一突破一方面是基于硬件獨(dú)立設(shè)計(jì)的新型偏振旋轉(zhuǎn)玻璃陣列、高精度的順序控制程序和高數(shù)值孔徑物鏡的應(yīng)用,另一方面是一種創(chuàng)新的重建算法。借鑒人眼識(shí)別信號(hào)和噪聲的機(jī)理,提出生物樣本在多維時(shí)空中是連續(xù)的、有噪聲的,這是構(gòu)造海森矩陣和完全隨機(jī)分布的先驗(yàn)知識(shí)。D指導(dǎo)超高分辨率熒光圖像的重建。
超靈敏海森結(jié)構(gòu)光顯微鏡是活細(xì)胞最長(zhǎng)時(shí)間分辨的超高分辨率顯微鏡。它適用于各種細(xì)胞和探針的熒光成像,可以說(shuō)所有的掃描共焦顯微鏡方案都可以使用Heisen結(jié)構(gòu)光顯微鏡,因此具有廣泛的應(yīng)用前景。
論文的作者是北京大學(xué)的黃小帥、華中科技大學(xué)的范俊超和北京大學(xué)的李柳菊。作者分別是北京大學(xué)陳亮一和華中科技大學(xué)譚珊,該研究得到自然科學(xué)基金(NSFC)重大儀器研究基金、重大科研項(xiàng)目、重點(diǎn)研究開發(fā)項(xiàng)目的支持。北京省自然科學(xué)基金委員會(huì)科技部、重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃和重點(diǎn)項(xiàng)目的經(jīng)費(fèi)計(jì)劃基金會(huì),陳亮一、黃曉帥等創(chuàng)始成員參加了高分辨率小型化T的開發(fā)。雙光子顯微鏡曾發(fā)表在《自然方法》雜志上,并于2017年榮獲中國(guó)十大科技進(jìn)步稱號(hào),今后將進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)海森結(jié)構(gòu)光的顯微體內(nèi)成像。
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