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注射用DNA制備與純化
材料：
1. 經(jīng)超高速離心分層抽取之 DNA
2. LMP agarose
3. 電泳設(shè)備
4. 5 M NaCl
5. 3 M NaOAc，pH 6.0
6. 酒精
7. TE
8. phenol，phenol/chloroform（1:1 v/v）等體積混合液
9. 65℃水浴槽
10. 1 ml 注射針筒及 0.22 mm 孔徑過(guò)濾膜
實(shí)驗(yàn)步驟：
1. 依據(jù)質(zhì)體構(gòu)筑時(shí)的圖譜，選擇適當(dāng)?shù)南拗泼笇①|(zhì)體的骨架（backbone）切除。
2. 將切割完全之 DNA 以含 EtBr 的 LMP 進(jìn)行電泳分離 DNA 及骨架。
3. 待分離完成后，在(長(zhǎng)波)紫外燈下以刀片切下欲純化的膠，分裝至微量離心管，平均每管約400 ml。
4. 將微量離心管置 65℃ 水浴槽中 約5'，觀(guān)察至膠完全融解。
5. 加入 20 ml 5M NaCl，再放入 65℃ 水浴槽中約1'。
6. 取出微量離心管后，依序以phenol萃取兩次、phenol/chloroform萃取一次、chloroform萃取一次。
7. 加入 1/20 體積之3 M NaOAc 及 2.5 倍體積之純酒精沉淀。
8. 離心14000 rpm，10'后，丟棄酒精。
9. 加入 70% 酒精。接著離心14000 rpm，1' 后去酒精。
10. 風(fēng)乾后溶于適量的TE。
11. 取些許之DNA定量（以膠電泳方式比對(duì) λ/H3 之 DNA 標(biāo)記）。
12. 將 DNA 之濃度以 TE 調(diào)整至 10-20 ng/ml。
13. 以 0.22 mm 孔徑之過(guò)濾膜過(guò)濾后，分裝小量至微量離心管，并儲(chǔ)存于 -80℃，
爾后每進(jìn)行一次顯微注射即取出一小管，且不再重覆使用。
血管正面的縫合更好紮實(shí)，因?yàn)楸趁鏁?huì)比較難縫。
看起來(lái)不難
實(shí)際應(yīng)該很難XD
話(huà)說(shuō)那臺(tái)比人還高的多人解剖體視顯微鏡
研究設(shè)備及器材
項(xiàng)目 器材名稱(chēng)
數(shù)量
項(xiàng)目
器材名稱(chēng)
數(shù)量
1
解剖顯微鏡
一臺(tái)
6
地毯
一塊
2
保麗龍球
數(shù)個(gè)
7
魔鬼氈
一片
3
蟑螂
數(shù)只
8
砝碼
數(shù)個(gè)
4
壓克力板
一片
9
木板
一塊
5
鐵絲
數(shù)支
10
飼育箱
四個(gè)
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