通州顯微鏡打一成語上海衛(wèi)生科學院開發(fā)了YISEL亞基中
作者: 發(fā)布時間:2022-07-02 17:28:15點擊:1991
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近年來,中國科學院生物化學與細胞生物學研究所的聰瑤研究小組在酵母內(nèi)亞單位EGFP標記策略的開發(fā)及其在真核細胞亞基鑒定中的應用,發(fā)表了最新研究成果。PⅡ伴侶伴侶ToC//Ctutu.這項工作開發(fā)了酵母亞基介導的EGFP標記定位(YISEL)方法。結(jié)合冷凍電鏡的三維重建,首先闡明了其開環(huán)結(jié)構(gòu)中的RT亞基的定位。這也為其它超大分子配合物的亞定位提供了新的策略。
細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的正確折疊對維持細胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)起著重要作用,真核細胞中分子伴侶TRiC/CCT可幫助約10%的細胞質(zhì)蛋白正確折疊,其功能的喪失與癌癥和神經(jīng)元密切相關。TRiC由8個不同的亞基、一個雙環(huán)背對背堆疊結(jié)構(gòu)和一個特定的亞基排列組成,每個亞基具有不同的基底結(jié)合能力、ATP結(jié)合能力和水解能力。研究TRiC亞基的排列對于了解其結(jié)構(gòu)和功能具有重要意義,TRiC亞基的空間分布因其同源性、不同亞基和高分辨率結(jié)構(gòu)信息有限而備受爭議。
研究者叢耀帶領博士生ZangYun.和研究生Wang Huping發(fā)展了YISEL(酵母內(nèi)亞基eGFP標記)方法,其中酵母同源重組用于將eG插入CCT1、CCT2、CCT4、CCT5、CCT6和CCT7亞單位的氨基酸序列中。利用eGFP標記分析TRiC低溫電子顯微鏡的結(jié)構(gòu),確定各亞基在開環(huán)結(jié)構(gòu)中的確切位置,解決了這一爭議,為定位提供了新的策略。超分子配合物的其它亞基。
本研究由周金秋、周昭才等生物化學和細胞學研究人員支持,冷凍電子顯微鏡系統(tǒng)、數(shù)據(jù)庫和計算分析系統(tǒng)、質(zhì)譜系統(tǒng)、核磁共振系統(tǒng)、顯微鏡系統(tǒng)等為課題提供支持。蛋白質(zhì)科學中心(上海)和自然科學基金、上海科學院、中國科學院(B類)的大規(guī)模蛋白質(zhì)制備系統(tǒng)。第二科學中心和中國科學院重大科學技術基礎設施開放研究項目。
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