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使用熒光顯微鏡觀察細菌記數器玻片
內容分析如下
（樣品準備）將樣品菌液取出后，以 10,000 x g 離心5分鐘，加入預先準備的稀釋染液,
（染色原理）而稀釋染液的備制是先將染劑套組內的兩種核酸染劑，利用兩染劑對細胞膜的穿透能力不同來區分活菌或死菌，
其中SYTO 9能穿透完整或受傷的細胞膜進行核酸的標記 ，而propidium iodide 僅能穿透受傷的細胞膜，且會與SYTO 9競爭核酸標記的位置，
（染色結果）使死菌或受傷的菌體染成熒光紅色；活菌則呈現熒光綠色。
（染色步驟）將SYTO 9 和 propidium iodide 做等倍體積混合，再取 3 μl
混合染劑至1ml以0.2 μm濾膜過濾之無菌的 0.5% NaCl 鹽水溶液稀釋。當菌體在黑暗操作染色處理30分鐘后，
（觀察計數）取菌液置于細菌記數器玻片上，至少取五個以上視野使用熒光顯微鏡觀察照相，
細菌記數器玻片深度為0.02 mm乘上一視野的表面積求得菌液的體積，再換算計數成每毫升菌液中的總活菌數目。
如何計數活菌數？取出樣品菌液后，離心5分鐘（10000xg）（取菌體？菌液？），在黑暗中加稀釋染液30min，
至于記數器玻片上，并取5個以上進行熒光顯微鏡照相，最后0.2nm野表面積＝菌液體積，再計算總菌菌數/菌液（ml），
其中稀釋染劑利用SYTO9測活菌，呈熒光綠色，propidium iodide測死菌或受傷的菌，呈熒光紅。
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