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顯微鏡下調(diào)整針的焦距-微小操作制程輔助儀器
顯微注射
（一）準(zhǔn)備顯微注射用針
1.取一干凈之大培養(yǎng)皿，在一側(cè)鋪一塊封口膜（parafilm），將 parafilm
折疊成有厚度條狀，并黏上雙面膠，固定在另外一側(cè)。
2.衛(wèi)生紙浸水揉成團(tuán)狀，置培養(yǎng)皿兩側(cè)。
3. 在上面滴上要注射之 DNA，小心放上針，使針的恰巧碰到 DNA
水珠，針的另一端固定在雙面膠上墊高。如下頁(yè)圖四所示。放置一段
時(shí)間，利用虹吸作用可以將液體吸入針中4.將針固定在 needle holder 上，用粗調(diào)節(jié)輪將握針器末端的針移至中
央。
5.顯微鏡下調(diào)整針的焦距并將針頭位置移到視野的正中央，接著將針輕
微地上移，使針的前端變得稍微模糊
制作顯微注射用玻片（microinjection pad）及測(cè)試
1.配制 2﹪的 agarose。
2.取一玻片，在上面滴上一滴 agarose（約 25μl），在其未凝固之前蓋
上另一玻片，使之呈扁平狀，等到凝固后輕輕將上方玻片水平移開(kāi)。
3.反覆 2.制作數(shù)個(gè) microinjection pad。
4.放在室溫下過(guò)夜或是放在 80°C 的 heater 上 1 小時(shí)，放在一旁備用。
5.取一完成的 microinjection pad，在上面呵氣，紀(jì)錄呵氣時(shí)間。迅速滴
上一滴 Halocarbon oil 700。
6. 用挑蟲(chóng)用針將一只線蟲(chóng)挑起并輕放到 microinjection pad 上，用睫毛較
長(zhǎng)的針輕壓蟲(chóng)，使蟲(chóng)可以固定在 microinjection pad 上。
7. 約半小時(shí)后，在油滴中加入 PBS，觀察線蟲(chóng)是否有離開(kāi)
microinjection pad 并游動(dòng)
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