通州偏光顯微鏡的偏極光觀察無需染色的細胞有哪些特點
作者: 發布時間:2022-07-02 20:48:46點擊:1720
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偏光顯微鏡的偏極光觀察無需染色的細胞有哪些特點
Digitonin(洋地黃)反應
染色機轉
此法可使用未酯化之膽??固醇。 Digitonin為天然存在之Glncoside,
其與未酯化之膽??固醇行成結晶狀之沉淀復合物。
染色方法
1、以10 %中性Formalin緩沖液固定或用新先標本。
2、冷凍切片,6 ~ 8μm厚度切之。
3、將切片置于0.5 % Digitonin Solution數小時。
4、以50 % Alcohol洗滌之。
5、將切片一部份以Sudan Ⅳ or Oil Red O作對比染色。
6、以Apathy's Gum Syrup or Glycerin Gelatin固封。
染色結果
以偏光顯微鏡偏極光觀察未作對比染色部份。其形成針狀或成束之Cholesteryl
Digitonides。對于此染色部份,膽固醇具雙折光性不呈染色
但膽固醇酯可被油溶性染料染色而喪失其雙折光性。
其結果不溶于95 % Alcohol、Acetone、Ethyl Ether or Water,
惟溶于熱Alcohol & Methyl Metanol,易溶于Glacial Acetic Acid
而極易溶于Pyridine & Chloral Hydrate。
本法用藥 0.5 % Digitonin in 50 % Alcohol
內在HRP之存在會造成困難,尤其于固
定組織之染色時。使用冷凍切片時,大部份紅血球會因HRP
溶血而消失,其于白血球之存在,可由戲胞而辨知。
一般使用內在HRP滅活化之方法為將
切片以甲醇與過
氧化氫混合液處理。此法不影響免疫球蛋白之染色,但是影
響抗原之染色則須加以測試。
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