西城細(xì)胞培養(yǎng)簡(jiǎn)介-移動(dòng)細(xì)胞觀察用倒置生物顯微鏡

作者：發(fā)布時(shí)間：2022-07-02 20:54:58點(diǎn)擊：1824

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細(xì)胞培養(yǎng)簡(jiǎn)介-移動(dòng)細(xì)胞觀察用倒置生物顯微鏡

細(xì)胞培養(yǎng)

所謂的體外細(xì)胞與組織培養(yǎng)，是指在活體外利用人工供給的養(yǎng)分與

環(huán)境來(lái)維持細(xì)胞的生命。體外細(xì)胞培養(yǎng)需瞭解細(xì)胞生長(zhǎng)週期，培養(yǎng)液特

性，細(xì)胞解凍、分盤(pán)、及植入支架(Scaffold)，及細(xì)胞計(jì)數(shù)，

以下就各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)之目的加以說(shuō)明：

●細(xì)胞解凍：冷凍細(xì)胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結(jié)晶而

對(duì)細(xì)胞造成傷害，導(dǎo)致細(xì)胞之死亡。解凍的方法：

1. 自液態(tài)氮中取出冷凍管，立即放入 37°C 水槽中快速解凍。

2. 取出 0.9ml 解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入有培養(yǎng)基之 37°C培養(yǎng)容器內(nèi)
(稀釋比例為 1:10～1:15)，混合均勻，放入 CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞貼附隨即更換新鮮培養(yǎng)基，
另取 0.1ml 解凍細(xì)胞懸浮液作存活測(cè)試。

3. 若需去除冷凍保護(hù)劑，則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有 5-10ml

培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，以 1,500 rpm, 離心 5 分鐘，移去上清液，加

入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入 CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

細(xì)胞活化后，約需數(shù)日或繼代一至二代，細(xì)胞生長(zhǎng)或特性表現(xiàn)才會(huì)

恢復(fù)正常﹙例如產(chǎn)生單株抗體或是其他蛋白質(zhì)﹚，故解凍后的細(xì)胞需經(jīng)

過(guò)培養(yǎng)后分盤(pán)始能做為實(shí)驗(yàn)用

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